Das Tor steht an der ehemaligen Südgrenze der „Leoninischen Stadt“, dh der von den Mauern von Papst Leo IV. Als Verteidigungsanlage gegen die Sarazenen, die Rom 845 n. Chr. Geplündert hatten, umgebenen Fläche.

Die Mauern haben einen Umfang von etwa 3 Kilometern. Das Santo Spirito-Tor wurde 1543 von Antonio Sangallo dem Jüngeren erbaut und später im Jahre 1564 im Auftrag von Papst Pius IV Medici von Stadtmauern umrahmt.

Die Säulen enden grob in einer modernen Betonkonstruktion. Sangallos Plan, einen monumentalen Eingang zum Vatikan zu schaffen, wurde nie vollendet.